方法依據:2015版 中國藥典一部,第272頁
色譜柱:JADE-PAK? Phenyl-2 5μm 250×4.6mm(貨號:0379-2546)
流動相:乙腈:3%冰醋酸(15:85)
流速:1.0ml/min 波長:326nm
柱溫:室溫 進樣量:5μL
Tips:
1. 根據2015版《中國藥典》方法,JADE-PAK? Phenyl-2 5μm 250×4.6mm 完全滿足方法要求(芥子堿理論塔板數≥5000),并能與主峰相鄰的雜質達到基線分離,分離度2.0以上;
2. 有效成分芥子堿硫氰酸鹽遇光易分解,前處理時注意要避操作,使用棕色瓶;
3. 流動相有機相含量比較低,樣品制備是用到70%甲醇做提取溶劑,溶劑含有機溶劑較高,容易引起“強溶劑效應”,可以降低進樣體積、延長柱前管路或在提取好樣品時,揮干溶劑用流動相復溶,來減低“強溶劑效應”;
4. 《2015版 中國藥典》在樣品制備方法上要求超聲(功率250W,頻率42kHz)處理,而市面上的超聲儀均沒有標明頻率,建議用頻率≥42kHz的超聲儀超聲處理樣品,有助于對目標成分芥子堿硫氰酸鹽的提取、檢測。